檢驗技師考點:抗血清的檢定
含有特異性抗體的抗血清是放射免疫分析的主要試劑,常以抗原免疫小動物誘發產生多克隆抗體而得。抗血清的質量直接影響分析的靈敏度和特異性。抗血清質量的.指標主要有親和常數、交叉反應率和滴度。
1.親和常數親和常數(affinityconstant)常用K值表示。它反映抗體與相應抗原的結合能力。K值的單位爲mol/L,即表示1mol抗體稀釋至若干L溶液中時,與相應的抗原結合率達到50%.抗血清K值越大,放射免疫分析的靈敏度、精密和準確度越佳。抗血清的K值達到109~1012mol/L才適合用於放射免疫分析。
2.交叉反應率放射免疫分析測定的物質有些具有極爲類似的結構,例如甲狀腺素的T3、T4,雌激素中的雌二醇、雌三醇等。針對一種抗原的抗血清往往對於其類似物會發生交叉反應。因此交叉反應率反映抗血清的特異性,交叉反應率過大將影響分析方法的準確性。交叉反應率的測定方法爲用與抗血清相應抗原及其類似物用同法進行測定,觀察置換零標準管50%時的量。以T3抗血清爲例,置換零標準50%T3爲1ng,其類似物T4則需200ng,則其交叉反應率爲:1/200=0.5%.
3.滴度滴度係指將血清稀釋時能與抗原發生反應的最高稀釋度。它反映抗血清中有效抗體的濃度。在放射免疫分析中滴度爲在無受檢抗原存在時,結合50%標記抗原時抗血清的稀釋度。
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