2018臨牀檢驗技師練習題:酶免疫技術

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2018臨牀檢驗技師練習題:酶免疫技術

  一、A1

1、下圖所示的爲哪一種ELISA技術的反應原理示意圖()。

A、雙抗原夾心法

B、雙位點一步法

C、間接法測抗體

D、競爭法

E、捕獲法

2、鉤狀效應是指用ELISA一步法測定標本中待測抗原時,抗原濃度過(),實測值偏()的現象,極易造成假陰性

A、低,高

B、高,高

C、高,低

D、低,低

E、高,不變

3、ELISA試驗中最常用的標記酶是()。

A、AST

B、HRP

C、ACP

D、LDH

E、ALT

4、酶增強免疫測定技術是最早取得實際應用的()。

A、均相酶免疫測定

B、異相酶免疫測定

C、固相酶免疫測定

D、液相酶免疫測定

E、固相-液相酶免疫測定

5、利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體的方法,通常稱爲()。

A、雙抗體夾心法

B、雙位點一步法

C、間接法

D、競爭法

E、捕獲法

6、ELISA中最常用的固相載體是()。

A、聚氯乙烯

B、聚苯乙烯

C、三聚氧胺

D、瓊脂糖

E、尼龍膜

7、均相酶免疫測定不具有的特點是()。

A、常用於半抗原和小分子的檢測

B、操作簡便,易於自動化

C、不易受樣品中的內源性酶的干擾

D、酶與抗原結合後仍保留酶和抗原的活性

E、靈敏度不及異相酶免測定

8、酶增強免疫測定技術(EMIT)是一種()。

A、非均相酶免疫測定技術

B、均相酶免疫測定技術

C、酶免疫組織化學技術

D、酶免疫測定與電泳相結合的技術

E、電泳技術

9、ELISA板包被後,最常用的封閉物質是()。

A、人白蛋白

B、人球蛋白

C、牛血清白蛋白

D、牛血清球蛋白

E、鼠白蛋白

10、可用免疫滲濾試驗和免疫層析試驗檢測的項目沒有()。

A、抗HCV

B、HIV

C、HCG

D、HBsAg

E、HAV

11、製備抗體酶結合物的方法通常採用()。

A、戊二醛交聯法

B、糖原染色法

C、免疫印跡法

D、酶耦聯測定法

E、捕獲競爭法

12、下列不屬於ELISA測定方法中所必需的試劑()。

A、固相的抗原或抗體

B、酶標記的抗原或抗體

C、酶作用的底物

D、戊二醛交聯劑

E、稀釋的血清

13、斑點免疫層析試驗最常用的載體材料是()。

A、乙酸纖維素膜

B、尼龍膜

C、濾紙

D、硝酸纖維素膜

E、玻璃纖維膜

14、用ELISA抗體夾心法檢測抗原A時,固相載體的包被物是()。

A、酶標記A抗體

B、未標記的抗A抗體

C、未標記抗原A

D、酶標抗球蛋白抗體

E、酶標記的A抗原

15、ELISA檢測中“鉤狀效應”(hookeffect)是指()。

A、間接法檢測抗體時抗體過量

B、雙抗體夾心一步法檢測抗原時抗原過量

C、雙抗體夾心法檢測抗原時RF的干擾

D、檢測的假陽性反應

E、競爭法檢測抗體時特異性問題

16、ELISA試驗以HRP爲標記酶時,常用的供氧底物爲()。

A、OPD

B、OT

C、YMB

D、ABTS

E、PNP

17、艾滋病病毒檢測的確診試驗通常採用的檢測方法是()。

A、競爭法

B、免疫印跡法

C、化學發光法

D、斑點-ELISA法

E、斑點免疫滲濾試驗

  二、B

1、A.免疫印跡法

A(雙抗體夾心法)

C.自身紅細胞凝集試驗

A(間接法)

E.免疫組織化學技術

<1> 、測定HIV抗體確診HIV感染常用的方法是()。

<2> 、對相應的抗原進行定性、定位和定量測定常用的方法是()。

<3> 、檢測抗原最常用的方法是()。

<4> 、可用於HIV抗體、HBsAg的檢測的方法是()。答案部分

  一、A1

1、【正確答案】 B

【答案解析】酶聯免疫吸附試驗(ELISA)的位點一步法是在雙抗體夾心法測定抗原時,如應用針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作爲固相抗體和酶標抗體,則可如圖中所示,在測定時可使標本的加入和酶標抗體的加入兩步並作一步。此法不但簡化了操作,縮短了反應時間,如應用高親和力的單克隆抗體,測定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的`應用使測定抗原的ELISA提高到新水平。

2、【正確答案】 C

【答案解析】

3、【正確答案】 B

【答案解析】在ELISA中,常用的酶爲辣根過氧化物酶(HRP)和鹼性磷酸酶(AP)。應用AP系統,其敏感性一般高於應用HRP系統,空白值也較低。但由於AP較難得到高純度製劑,穩定性較HRP低,價格較HRP高,製備酶結合物時得率較HRP低等原因,國內在ELISA中一般均採用HRP。

4、【正確答案】 A

【答案解析】均相酶免疫測定方法有酶增強免疫測定技術(EMIT)和克隆酶供體免疫分析方法。其中,酶增強免疫測定技術是最早取得實際應用的酶免疫測定方法。

5、【正確答案】 C

【答案解析】間接法是檢測抗體最常用的方法,其原理是利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,只要更換不同的固相抗原,就可以用一種酶標抗體檢測各種與抗原相應的抗體。

6、【正確答案】 B

【答案解析】酶免疫技術的主要試劑爲固相的抗原或抗體、酶標記的抗原或抗體和與標記酶直接關聯的酶反應底物。最常用的固相載體物質是聚苯乙烯。

7、【正確答案】 C

【答案解析】均相酶免疫測定是將半抗原或小分子抗原如藥物、激素、毒、興奮劑等與酶結合製成酶標記物,酶與抗原(半抗原)結合後仍保留酶和抗原(半抗原)的活性。均相酶免疫測定操作簡便、快速、適合於自動化,應用廣泛,不僅可檢測藥物、激素、毒、興奮劑等半抗原或小分子抗原,也可測定大分子蛋白質、病毒及細胞性抗原成分。

最大缺點是易受樣品中非特異的內源性酶、酶抑制藥及交叉反應物的干擾,而且由於採用競爭性結合分析原理,靈敏度不及異相酶免測定。

8、【正確答案】 B

【答案解析】酶增強免疫測定技術(EMIT)是均相酶免疫測定技術。EMIT的基本原理:半抗原與酶結合成酶標半抗原,保留半抗原和酶的活性,當酶標半抗原與抗體結合後,所標的酶與抗體密切接觸,使酶的活性中心受到影響而活性被抑制,反應後酶活力大小與標本中的半抗原量呈一定的比例,從酶活力的測定結果可推算出標本中半抗原的量。

9、【正確答案】 C

【答案解析】將抗原或抗體固相化的過程稱爲包被。由於載體的不同,包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板爲載體,通常將抗原或抗體溶於緩衝液(最常用的爲pH9.6的碳酸緩衝液)中,加於ELISA板孔中在4℃過夜,經清洗後即可應用。如果包被液中的蛋白質濃度過低,固相載體表面有能被此蛋白質完全覆蓋,其後加入的血清標本和酶結合物中的蛋白質也會部分地吸附於固相載體表面,最後產生非特異性顯色而導致本底偏高。在這種情況下,如在包被後再用1%~5%牛血清白蛋白包被一次,可以消除這種干擾。這一過程稱爲封閉。包被好的ELISA板在低溫可放置一段時間而不失去其免疫活性。

10、【正確答案】 E

【答案解析】免疫滲濾試驗和免疫層析試驗具有簡便、快速、單份測定、可立等結果等優點,無需任何儀器設備,試劑穩定,因此多用於急診檢驗。這類試驗不能準確定量,所以主要限於檢測正常體液中不存在的物質以及正常含量極低而在特殊情況下異常升高的物質。目前臨牀檢驗中已開展的項目有HCG、抗HCV和抗HIV、HBsAg等,新項目正在不斷髮展中。

11、【正確答案】 A

【答案解析】製備抗體酶結合物的方法通常有戊二醛交聯法、過碘酸鹽氧化法和標記抗體鑑定法。

12、【正確答案】 D

【答案解析】 ELISA是在固相載體上包被抗原或抗體後,通過抗原抗體反應使酶標抗體(或酶標抗原)結合到載體上,經洗滌使結合的酶標抗體和遊離的酶標抗體分離,洗去遊離的酶標抗體(或酶標抗原)。在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體。②酶標記的抗原或抗體。③酶作用的底物。間接法和捕獲法還使用稀釋的血清標本做試劑。戊二醛是一種雙功能團試劑,可以使酶與蛋白質或其他抗原的氨基通過它而耦聯。與ELISA的方法相反。

13、【正確答案】 D

【答案解析】斑點免疫層析試驗以硝酸纖維素爲載體,利用微孔濾膜的毛細管作用,滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移,猶如層析一般。

14、【正確答案】 B

【答案解析】 ELISA抗體夾心法檢測抗原A時,固相載體的包被物是未標記的抗A抗體。

15、【正確答案】 B

【答案解析】在雙位點一步法測定中,應注意鉤狀效應,類同於沉澱反應中抗原過剩的後帶現象。當標本中待測抗原濃度相當高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合,而不再形成夾心複合物,所得結果將低於實際含量。鉤狀效應嚴重時甚至可出現假陰性結果。

16、【正確答案】 A

【答案解析】許多化合物可作爲HRP的供氧體,在ELISA中常用的供氫體底物爲鄰苯二胺(OPD)、四甲基聯苯胺(FMB)和ABTS。OPD爲在ELISA中應用最多的底物,靈敏度高,比色方便。

17、【正確答案】 B

【答案解析】在艾滋病病毒感染中免疫印跡法作爲確診試驗。

  二、B

<1>、【正確答案】 A

【答案解析】免疫印跡法在艾滋病病毒感染中作爲確診試驗。

<2>、【正確答案】 E

【答案解析】免疫組織化學技術是指酶標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應的抗原進行定性、定位和定量測定的一項技術。

<3>、【正確答案】 B

【答案解析】

<4>、【正確答案】 C

【答案解析】自身紅細胞凝集試驗可用於HIV抗體、HBsAg的檢測,靈敏度與間接血凝試驗相仿。