二苯胺鑑定dna

實驗原理1. DNA在NaCl溶液中的溶解度,是隨着NaCl的濃度的變化而改變的。 當NaCl的物質的量濃度爲0.14 mol/L時,DNA的溶解度最低。利用這一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。不溶於酒精溶液,但是細胞中的某些物質則可以溶於酒精溶液。利用這一原理,可以進一步提取出含雜質較少的`DNA。遇二苯胺(沸水浴)會染成藍色,因此,二苯胺可以作爲鑑定DNA的試劑。

二苯胺鑑定dna

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DNA分子中2-脫氧核糖殘基在酸性溶液中加熱降解,產生2-脫氧核糖並形成ω-羥基-γ-酮基戊酸,後者與二苯胺試劑反應產生藍色化合物,其反應如下圖。藍色化合物在595nm處有最大吸收,且DNA在40µg ~400µg範圍內時,吸光度與DNA濃度成正比。在反應液中加入少量乙醛,可以提高反應靈敏度。

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甲基綠能把DNA染成綠色,爲什麼在DNA粗提取與鑑定試驗中則用二苯胺鑑定?帶着這個問題我上網查資料,經過我反覆的思考,哈哈.....終於想明白了。我們在觀察DNA、RNA的分佈實驗中用的是甲基綠和吡羅紅混合染色劑染色,由於甲基綠和吡羅紅與DNA、RNA的親和力不一樣,呈綠色的是DNA,呈紅色的是RNA,我們很容易用顯微鏡觀察到DNA、RNA主要分佈在那裏?裏面強調的是用甲基綠和吡羅紅混合染色劑,所以隱含的意思是不能單獨使用一種染色劑,要是單獨用甲基綠染色就會把RNA染成綠色。 DNA粗提取與鑑定這個實驗,DNA鑑定則換成用二苯胺,在這個DNA粗提取過程中,用改變氯化鈉濃度辦法將蛋白質與DNA分開,用冷酒精處理進一步將DNA與RNA、蛋白質分開。一系列的操作就是要獲得純度較高的DNA,最後獲得的純度較高的DNA不能排除有RNA,所以此時用甲基綠鑑定DNA、RNA都被染成綠色,所以不能說綠色一定是DNA拍賣公司而改用二苯胺就不一樣了,DNA和二苯胺反應的產物成藍色,RNA則沒有這種顏色反應。所以用二苯胺鑑定呈藍色的一定是DNA,並且藍色深淺與DNA含量高低有關。

1、二苯胺與甲基綠能否混用

這是用於鑑定DNA的存在的兩種試劑,二苯胺加熱法中,呈現藍色反應。用甲基綠溶液直接滴在有DNA絲狀物的載玻片或玻棒上,呈藍綠色反應。只用一種即可,不混合用。前者要加熱,後者不加熱。

2、兩者都可以和DNA反應,應該怎樣區分它們呢

甲基綠甲基綠是鹼性染料。它是綠色粉末狀,能溶於水(溶解度8%)和酒精(溶解度3%)。甲基綠是最有價值的細胞和染色劑,細胞學上常用來染染色質,跟酸性品紅一起可作植物木質部的染色

3、DNA的鑑定→DNA的鑑定可用二苯胺法,DNA遇到二苯胺變爲藍色;還可以用“甲基綠”法,“甲基綠”使DNA變爲藍綠色。

用“甲基綠”法鑑別DNA時,可將“甲基綠”直接滴到玻璃棒的絲狀物上後,要用水充分沖洗掉浮色後再觀察。

配製二苯胺試劑→取0.1毫升B液,滴入到10毫升A液中,混勻。⑦鑑定→取4毫升DNA提取液放入試管中,加入4毫升二苯胺試劑,混勻後觀察溶液顏色(不變藍)。用沸水浴(100°)加熱10分鐘。在加熱過程中,隨時注意試管中溶液顏色的變化(逐漸出現淺藍色)。

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1. [comment]∶評論的話   2. [expository notes]∶含有說明、解釋或評論的話;作說明或講解用的話   偶爾有對正文的講解和帶解釋性的注,但無評語   3   對某人的看法與對這人的感覺   詳細解釋      評論的話。   清 唐鑑 《廩貢生王府君墓誌銘》:“昔年官京師,閱 倭艮峯 日記,見其上方評語,有曰‘子 涵 子 潔 ’者,問之,則其 河南 同志 王檢心 、 王滌心 也。”《二十年目睹之怪現狀》第一回:“就將這本冊子的記載,改做了小說體裁,剖作若干回,加了些評語。” 趙樹理 《三裏灣·決心》:“ 玉生 一時想不出適當的評語來,只籠統地說:‘我覺着你各方面都很好!’” 編輯本段評語範文  X同學是個文靜懂事的女孩,踏實、穩重、有禮貌,時刻起着模範帶頭作用,給同學們作出表率。上課時用心聽講的神情,讓人感到你的專注、認真。你的作業乾淨整潔、字跡又漂亮,令老師感到非常滿意。你思維靈活,接受能力較強,勤于思考,大膽質疑。你的學習成績一直都很好,在班裏是一個的好女生。願你永遠健康、漂亮、快樂、上進,在知識的海洋裏遨遊,做一個強者、勝利者!你的聰明加上勤奮好學會令你成功,老師深深地祝福你[1]。