免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由於抗原抗體反應具有高度的特異性，所以當抗原抗體發生反應時，只要知道其中的一個因素，就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的'熒光色素標記在抗體(或抗原)上，與其相應的抗原(或抗體)結合後，在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。
直接法：將標記的特異性熒光抗體，直接加在抗原標本上，經一定的溫度和時間的染色，用水洗去未參加反應的多餘熒光抗體，室溫下乾燥後封片、鏡檢。
間接法：如檢查未知抗原，先用已知未標記的特異抗體(第一抗體)與抗原標本進行反應，用水洗去未反應的抗體，再用標記的抗抗體(第二抗體)與抗原標本反應，使之形成抗原—抗體—抗體複合物，再用水洗去未反應的標記抗體，乾燥、封片後鏡檢。如果檢查未知抗體，則表明抗原標本是已知的，待檢血清爲第一抗體，其它步驟的抗原檢查相同。
標記的抗抗體是抗球蛋白抗體，同於血清球蛋白有種的特異性，如免疫抗雞血清球蛋白只對雞的球蛋白髮生反應，因此，製備標記抗體適用於雞任何抗原的診斷。
