臨牀微生物檢驗之病原性真菌檢驗

真菌是一大類不含葉綠素,無根、莖、葉,由單細胞或多細胞組成的真核細胞型微生物。大部分真菌對人類有益,能引起人類疾病的病原性真菌主要包括淺部真菌和深部真菌。下面是yjbys小編爲大家帶來的臨牀微生物檢驗之病原性真菌檢驗的知識,歡迎閱讀。

臨牀微生物檢驗之病原性真菌檢驗

  一、常見單細胞真菌的形態觀察

1、新型隱球菌墨汁負染色片:可見菌體呈球形,大小不一,有很厚的莢膜,包圍在菌體周圍,透明發亮,並可見發芽的菌體。

2、白色念珠菌菌體形態:用患者的棉拭子標本常法塗片,革蘭氏染色,鏡檢。顯微鏡下可見菌體呈卵圓形,較葡萄球菌大2-5倍,細胞出芽伸長而成假菌絲,在假菌絲生長點上有芽生孢子及沿假菌絲頂端生長的大而圓的.厚膜孢子。

  二、皮膚絲狀菌的檢查

材料

病人的甲屑、皮屑或毛髮、10%KOH溶液、載玻片、蓋玻片、小鑷子、普通光學顯微鏡等。

方法:

1、採標本:用鈍刀在手、足、體癬損害部位邊緣輕輕刮取皮屑,甲癬可用小刀刮取病損指(趾)甲深層碎屑。

2、製片:用小鑷子取少許皮(甲)屑標本置於載玻片中央,滴1-2滴10%KOH溶液,覆加一蓋玻片,在火焰上緩慢加熱,以加速角質溶解,使標本透明,然後輕輕加壓使成薄片,驅走氣泡並吸去周圍溢液。

3、鏡檢:先用低倍鏡觀察有無真菌菌絲或孢子,再用高倍鏡觀察菌絲、孢子的特徵。鏡檢時光線應稍弱,使視野稍暗。陽性標本常可查見分支菌絲或孢子。

  三、真菌的培養

材料:

菌種、沙保氏培養基、平皿、載玻片、蓋玻片。

方法:

1、一般培養:分別將新型隱球菌、白色念珠菌、絮狀表皮癬菌接種於沙保氏培養基,於22℃-28℃下培養(深部真菌可培養於37℃環境),一週後觀察菌落特徵。真菌菌落在形態上可分爲三大類:

酵母型菌落:與細菌菌落相似,圓形、白色、邊緣整齊、表面光滑溼潤。

類酵母型菌落:同酵母型菌落,圓形、較大、白色,但菌落根部有假菌絲長入培養基內。

絲狀菌落:是多細胞真菌的菌落形式。有許多疏鬆的菌絲體構成,菌落呈棉絮狀、絨毛狀或粉末狀,菌落中央有皺摺,外圍有放射狀溝。其正面和背景又可顯示各種不同顏色。

2、小培養(玻片法):在無菌平皿中先傾注10-15ml沙保葡萄糖瓊脂,待凝固後,無菌操作將瓊脂切成約0.5cm的方塊,再將瓊脂塊移放在滅菌的載玻片上,然後在小塊培養基四邊接種已分純的真菌菌種,蓋上無菌蓋玻片,移入有一定溼度的無菌平皿內,置22℃-28℃孵育。動態觀察生長過程,根據菌絲和孢子的特點鑑定真菌類別。